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生化培養(yǎng)箱的作用及原理
生化培養(yǎng)箱發(fā)酵管內(nèi)裝有單倍或者三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,并在內(nèi)部倒置有小玻璃管。每個(gè)樣品采用三個(gè)不同的水樣量來(lái)接種,同一接種的水樣量至少要有五管,然后將水樣再分別接到裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的發(fā)酵管里,在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h。
生化培養(yǎng)箱的乳糖可以起到選擇的作用,因?yàn)楹芏嗉?xì)菌是不能夠發(fā)酵乳糖的,而大腸菌群能夠發(fā)酵乳糖并能夠產(chǎn)生酸產(chǎn)生氣。培養(yǎng)液中適當(dāng)加入溴甲酚紫以作為酸度指示劑,細(xì)菌產(chǎn)酸后,培養(yǎng)液中原來(lái)的紫色會(huì)變成了黃色。
生化培養(yǎng)箱產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管是表明試驗(yàn)為陽(yáng)性的,如果當(dāng)?shù)构軆?nèi)產(chǎn)氣不是非常明顯,可輕拍發(fā)酵管,有小氣泡升起的時(shí)候既是為陽(yáng)性。
復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn):
用初發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果的生化培養(yǎng)箱的發(fā)酵管加以輕微振蕩,用3mm的接種環(huán)將培養(yǎng)物(2-3環(huán))轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液之中,在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h(提高培養(yǎng)溫度可造成不利于來(lái)自自然環(huán)境的大腸菌群的生長(zhǎng))。培養(yǎng)后立即觀察,如果發(fā)酵管產(chǎn)氣則證實(shí)為糞大腸菌群陽(yáng)性。